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¿Cómo se encuentra la concentración de ADN a partir de la absorbancia?
¿Cómo se encuentra la concentración de ADN a partir de la absorbancia?

Video: ¿Cómo se encuentra la concentración de ADN a partir de la absorbancia?

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Video: Cuantificación de ADN por absorbancia UV paso a paso 2024, Noviembre
Anonim

Concentración de ADN se estima midiendo el absorbancia a 260 nm, ajustando el A260 medición de la turbidez (medida por absorbancia a 320 nm), multiplicando por el factor de dilución y usando la relación que un A260 de 1,0 = 50 µg / ml de dsDNA puro.

Asimismo, la gente pregunta, ¿cómo se encuentra la concentración de ADN?

Para determinar la concentración de ADN en la muestra original, realice el siguiente cálculo:

  1. concentración de dsDNA = 50 μg / mL × OD260 × factor de dilución.
  2. Concentración de dsDNA = 50 μg / mL × 0,65 × 50.
  3. Concentración de dsDNA = 1,63 mg / mL.

Además, ¿qué es una buena concentración de ADN? A bien calidad ADN la muestra debe tener una A260/A280 relación de 1,7-2,0 y una A260/A230 proporción superior a 1,5, pero dado que la sensibilidad de las diferentes técnicas a estos contaminantes varía, estos valores solo deben tomarse como una guía para la pureza de su muestra.

De esta forma, ¿el ADN absorbe a 280 nm?

La relación de absorbancia a 260 Nuevo Méjico vs 280 nm es comúnmente utilizado para evaluar ADN contaminación de soluciones de proteínas, ya que las proteínas (en particular, los aminoácidos aromáticos) absorber luz en 280 nm.

¿Cómo se usa NanoDrop para la concentración de ADN?

Básicamente el nanodrop te da la opción de seleccionar ADN , ARN, Proteínas. Necesito seleccionar ADN , luego coloque 2 ΜL de agua (mili Q de preferencia), seleccione "Blanco" y luego coloque otros 2 ΜL de agua para confirmar que la medida es 0. Luego, coloque 2 ΜL de su muestra. Obtendrás la medida.

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