¿Por qué el espectrofotómetro debe ajustarse a una longitud de onda en particular?
¿Por qué el espectrofotómetro debe ajustarse a una longitud de onda en particular?

Video: ¿Por qué el espectrofotómetro debe ajustarse a una longitud de onda en particular?

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Video: Ejercicios resueltos de Espectrofotometría 2024, Diciembre
Anonim

Cuando ajusta el longitud de onda en un espectrofotómetro , usted están cambiando la posición del prisma o rejilla de difracción para que diferentes longitudes de onda de luz están dirigido a la hendidura. Cuanto menor sea el ancho de la hendidura, mejor será la capacidad del instrumento para resolver varios compuestos.

Por lo tanto, ¿a qué longitud de onda se colocará el espectrofotómetro?

Dependiendo del rango de longitud de onda de la fuente de luz, se puede clasificar en dos tipos diferentes: Espectrofotómetro UV-visible: utiliza luz en el rango ultravioleta (185 - 400 nm) y rango visible (400 - 700 nm ) del espectro de radiación electromagnética.

Asimismo, ¿por qué necesita calibrar el espectrómetro cada vez que cambia la longitud de onda? Espectrofotómetro necesita ser calibrado contra una solución en blanco así que ese mediciones después de que pueda usar la absorbancia de la solución en blanco como referencia cero. Medida de la capacidad de una sustancia para absorber la luz de un determinado longitud de onda.

¿A qué longitud de onda se deben tomar las lecturas?

Llevar lecturas a intervalos de 5 nm un poco antes y después de esto longitud de onda . Por ejemplo, si la absorbancia máxima se encontró a 450 nm, entonces para obtener una leyendo de λmax, tomar absorbancia lecturas a 440, 445, 455 y 460 nm.

¿Por qué mide la absorbancia de la solución a 550 nm?

Las proteínas reaccionan con iones de cobre en condiciones alcalinas. solución para formar un complejo de color violeta que absorbe la luz en 550 nanómetro . Por lo tanto, por medición la concentración del complejo, usando A550 ( Absorbancia a 550 nanómetro ), usted son también medición la concentración de proteína.

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