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¿Cómo se carga una muestra en cromatografía en columna?
¿Cómo se carga una muestra en cromatografía en columna?

Video: ¿Cómo se carga una muestra en cromatografía en columna?

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Video: Introducción a la cromatografía en columna 2024, Abril
Anonim

Para cargar la columna:

  1. Disuelva el muestra en la cantidad mínima de disolvente (5–10 gotas).
  2. Usando una pipeta o jeringa con una aguja gruesa, gotee el muestra directamente sobre la parte superior de la sílice.
  3. Una vez que todo muestra ha sido agregado, permita que el columna drenar de modo que el nivel de disolvente toque la parte superior de la sílice.

Con respecto a esto, ¿cuánta sílice usa en una columna?

Un buen intervalo es de 100/20 a 100/10 (5 a 10 ml) de eluyente por 100 g sílice . No es buena idea usar un solvente diferente aquí - la separación se verá seriamente comprometida.

En segundo lugar, ¿cómo funciona la cromatografía en columna ultrarrápida? Cromatografía flash . Capa fina cromatografia se utiliza para controlar las reacciones, comprobar la pureza de los compuestos y optimizar las mezclas de disolventes para cromatografía de columna . Es una micro-técnica que requiere cantidades muy pequeñas de compuesto.

Por lo tanto, ¿por qué es importante no dejar que la fase estacionaria se seque cuando se ejecuta una columna?

En otras palabras, la lechada dentro del columna nunca debería permitírsele secar . Si esto sucede, puede crear grietas y desniveles en el sólido. fase , lo que reducirá la eficacia de la separación. La muestra a separar se carga en solución en un disolvente adecuado, preferiblemente lo más concentrado posible.

¿Qué pasa si la columna se seca?

Si dejas que el la columna se seca la sílice comenzará a agrietarse y obtendrá una mala separación de sus compuestos. Como tu correr los columna , nunca deje que el nivel de disolvente baje del nivel del gel de sílice o obtendrá malos resultados.

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