¿Existen otros métodos para purificar los productos de PCR?
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Video: ¿Existen otros métodos para purificar los productos de PCR?

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Video: PCR: Reacción en Cadena de la Polimerasa (divulgación científica IQOG-CSIC) 2024, Mayo
Anonim

Para aquellas aplicaciones que requieran PCR limpieza o validación de PCR resultados allí son dos métodos seguido generalmente: Producto de PCR aislamiento mediante columna y gel purificación de un gel de agarosa.

En este documento, ¿qué tipo de cromatografía se utiliza para purificar productos de PCR?

Para purificar los productos de la PCR, se utiliza la cromatografía de exclusión por tamaño. Esto atrapa moléculas pequeñas como proteínas, imprimaciones y nucleótidos, mientras que las moléculas grandes, como los productos de PCR, son demasiado grandes para entrar en las perlas y pasar a través de la columna a los tubos de recogida.

Además, ¿cómo se purifica el ADN? Básicamente, puedes purificar tu ADN muestras mediante la lisis de sus muestras de células y / o tejidos utilizando el procedimiento más adecuado (rotura mecánica, tratamiento químico o digestión enzimática), aislando los ácidos nucleicos de sus contaminantes y precipitándolos en una solución tampón adecuada.

Además, ¿por qué purificamos el producto de PCR?

Purificación de ADN de un PCR La reacción es típicamente necesaria para el uso posterior y facilita la eliminación de enzimas, nucleótidos, cebadores y componentes tampón. Los métodos comúnmente usados emplean columnas giratorias que contienen una matriz de sílice a la que el ADN puede unirse selectivamente en presencia de sales caotrópicas.

¿Por qué se debe limpiar el ADN?

Nosotros limpio hasta ADN de soluciones acuosas para eliminar sales tampón, enzimas u otras sustancias que puedan afectar las aplicaciones posteriores. Los ejemplos incluyen reacción de PCR limpio hasta, limpio después de resúmenes de restricción y limpio de genómico o plásmido ADN contaminado con proteínas / desechos celulares.

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